河北农业大学学报

2020, v.43;No.214(06) 83-89+107

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

谷氨酰胺转氨酶在Pichia pastoris GS115中的表达及其发酵条件响应面法优化
Expression of transglutaminase in Pichia pastoris GS115 and optimization of its fermentation conditions using response surface methodology

于凡;刘双;陈海清;王红静;马雯;石楠;檀建新;

摘要(Abstract):

为了将筛选得到的吸水链霉菌107.3的谷氨酰胺转氨酶基因在毕赤酵母GS115中表达,并通过优化发酵条件来提高重组菌株酶的表达量,本试验构建了由吸水链霉菌前肽pro、kex2酶切位点、成熟酶mTGase 3部分组成的融合基因,电转至毕赤酵母GS115中进行表达;采用Plackett-Burman(PB)设计和响应面法(RSM)在摇瓶水平研究了重组毕赤酵母的发酵条件(接种量、诱导温度和时间、初始pH值和甲醇浓度)。结果表明:吸水链霉菌的TGase基因在毕赤酵母GS115中得获得成功表达,酶活力为0.3 U/mL;通过PB试验设计确定了影响产酶的显著性因素为诱导初始pH、甲醇浓度和接种量。进一步选择该3个显著因素进行RSM中心组合试验,确定了最优的产酶条件为:接种量OD_(600)为6、pH 7、甲醇浓度2.0%、诱导温度23℃、诱导时间72 h。优化发酵条件后,重组菌株产TGase酶活力可达1.1 U/mL,是初始酶活的3.6倍。本研究构建的MTG异源表达体系为MTG生产和分子改造提供了平台。

关键词(KeyWords): 谷氨酰胺转氨酶;毕赤酵母;Plackett-Burman(PB)设计;响应面法;吸水链霉菌

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 河北省重点研发计划项目(16275505D);; 河北省食品科学与工程学科“双一流”建设资金项目(2016SPGCA18)

作者(Author): 于凡;刘双;陈海清;王红静;马雯;石楠;檀建新;

Email:

DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2020.0116

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享