河北农业大学学报

2021, v.44;No.215(01) 25-32

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黄花菜八氢番茄红素脱氢酶基因HcPDS的克隆及VIGS转化表达验证
Cloning of phytoene dehydrogenase gene HcPDS from daylily and verification of VIGS transformation and expression

李森;程宵婧;侯非凡;公菲菲;刘娟;杜崴;亢秀萍;邢国明;

摘要(Abstract):

为了拓宽对黄花菜基因功能研究的技术体系,本研究以黄花菜‘大同黄花’为试验材料,基于转录组数据库检索和PCR技术克隆得到了黄花菜HcPDS基因完整编码序列,序列全长1710 bp,编码570个氨基酸。该基因编码的蛋白质具有PDS基因家族典型的Phytoene desat结构域,分子量为63.719 72 kD,等电点为7.53,是亲水不稳定性蛋白。通过序列比对,发现HcPDS基因与水仙、芦笋等植物中的PDS基因具有较高的同源性。通过构建黄花菜病毒诱导的基因沉默(VIGS)体系,黄花菜幼苗被侵染后,接种pTRV2-HcPDS的植株新叶出现不完全的光漂白现象,叶片中的HcPDS基因表达量相比接种TRV2空载的阴性对照和空白对照植株分别下降了73.33%和71.72%。空白对照和阴性对照植株叶片则无光漂白现象出现,且空白对照和阴性对照的HcPDS基因表达量相比无显著差异。所构建的黄花菜VIGS体系可有效沉默HcPDS基因,为黄花菜功能基因的鉴定与分析奠定了技术基础。

关键词(KeyWords): 黄花菜;基因克隆;病毒诱导的基因沉默;表达鉴定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山西省高等学校科技创新项目(2019L0375);; 山西省农业重点研发计划(重点)项目(201703D211001-04-05;201903D211011-01);; 山西农业大学青年拔尖创新人才支持计划(BJRC201601)

作者(Author): 李森;程宵婧;侯非凡;公菲菲;刘娟;杜崴;亢秀萍;邢国明;

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DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2021.0004

参考文献(References):

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