河北农业大学学报

2019, v.42;No.207(05) 8-14

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

小麦TaSnRK2.1蛋白的原核表达及抗体制备
Expression of TaSnRK2.1 by prokaryote and antibody preparation in wheat

乔金柱;麻楠;孙天杰;李姗;王冬梅;

摘要(Abstract):

为深入研究小麦TaSnRK2.1在小麦-叶锈菌互作过程中的功能,PCR扩增TaSnRK2.1的开放阅读框(ORF)全长,对其进行生物信息学分析。结果表明,该基因开放阅读框全长为1 029 bp,编码342个氨基酸,相对分子质量38.78 kDa,等电点为5.78。构建重组原核表达载体pColdⅡ-TaSnRK2.1,并转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)。使用终浓度0.5mmol/LIPTG诱导基因表达,并进行电泳检测。结果显示,诱导蛋白(包涵体)在约39 kDa处有明显条带,与预测蛋白分子量大小一致。利用Ni-NTA亲和层析纯化获得目的蛋白,并将之作为抗原制备兔源多克隆抗体。经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,抗体效价为1∶25 600,采用Western-blotting检测分析该抗体的特异性,结果显示该多克隆抗体能够特异结合TaSnRK2.1。本试验为进一步研究TaSnRK2.1在小麦-叶锈菌互作过程中的功能奠定了基础。

关键词(KeyWords): 小麦;TaSnRK2.1;原核表达;抗体制备;Western Blotting

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31171472;31871548);; 高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(优先发展领域)(20111302130001);; 河北省应用基础研究计划重点基础研究项目(12967149D)

作者(Author): 乔金柱;麻楠;孙天杰;李姗;王冬梅;

Email:

参考文献(References):

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享